UABDivulga - Barcelona recerca i innovació

La tuberculosis continua matant a 2 milions de persones cada any. Malgrat que el problema és especialment greu en països en vies de desenvolupament, la incidència de la malaltia també està augmentant al nostre medi. L’augment de soques del bacteri resistents als fàrmacs de primera línia (més eficients i menys tòxics) agreugen la situació. El lent creixement de Mycobacterium tuberculosis, el bacil causant de la malaltia, fa que es retardi varies setmanes el resultat de l’estudi de susceptibilitat als antimicobacterians, de forma que si un malalt està infectat amb una soca multiresistent, el risc de que la transmeti i contagiï als seus contactes abans de que es detecti la situació, és molt elevat. Per a detectar precoçment aquestes soques, s’han desenvolupat diferents tècniques moleculars que detecten al DNA del bacil les principals mutacions que causen les resistències, de forma que no cal esperar al cultiu i la detecció de la resistència és molt més ràpida.

Per aquest motiu, vam voler avaluar la utilitat d’una tècnica que combina una fase d’amplificació mitjançant PCR amb una tècnica de hibridació reversa en tires de nitrocel·lulosa (Genotype MTBDRplus) per a la detecció resistències a la rifampicina (mutacions al gen rpoB) i la isoniazida (mutacions als gens inhA i katG), tot comparant amb els resultats de detecció fenotípica convencional (BACTEC 460TB) i en el cas de les soques clíniques amb la seqüenciació.  L’assaig es va avaluar en  62 soques clíniques de M. tuberculosis i en 65 mostres clíniques directes (39 amb resultat de examen microscòpic positiu i 26 amb resultat  negatiu). La concordança global entre els resultats de MTBDRplus i BACTEC 460TB per a la detecció de susceptibilitat en soca clínica va ser de  98.3% per la rifampicina i de 79% per la isoniazida. Respecte les mostres clíniques directes, es van obtenir resultats vàlids al 78.45% de les mostres. En aquestes mostres, la concordança entre MTBDRplus i BACTEC 460 va ser de 98% per a la rifampicina i de 96.2% per a la isoniazida. La concordança es menor per a la Isoniazida degut a que les mutacions causants de la resistència en les soques que tenen baix nivell de resistència es troben en gens poc estudiats que no s’analitzen al test.

Amb els resultats obtinguts podem concloure que la tècnica avaluada és una eina útil i  pràctica pel maneig de la tuberculosi, ja que permet la detecció ràpida de resistències als dos principal fàrmacs antituberculosos en soques i mostres clíniques directes.