Anàlisi de fragments (GeneMapper)
- El seqüenciador automàtic permet l'anàlisi de la grandària i quantitat de fragments de DNA amplificats per PCR i marcats amb fluorescència, mitjançant el software GeneMapper.
- Aquesta metodologia utilitza primers marcats amb els mateixos fluorocroms que s'empren en la seqüenciació de DNA. Un dels fluorocroms s'utilitza sempre com a estàndard intern. Aquest estàndard té una doble funció. Primera i més important, donar la mida i la quantitat de cada fragment de PCR, eliminant la variació entre capil·lars. Segona, com a control positiu per al anàlisi, ja que encara que la PCR falli permet al software realitzar una assignació acurada dels resultats.
- El GeneMapper ofereix un anàlisi senzill i precís de PCRs¿ múltiples, doncs en una mateixa electroforesi es poden separar diferents fragments combinant grandàries i colors.
Equip: Seqüenciador ABI3500 Genetic Analyzer
Filtres: D, G5, Any4Dye
Condicions de les mostres per Seqüenciar | |
---|---|
Electroforesi de les mostres per Anàlisi de Fragments | Es realitza en capil·lars de 50 cm que permeten obtenir resultats en 1 o 2 hores. Les mostres venen preparades per l'usuari amb Formamida i el marcador intern |
Producte de PCR marcat amb fluorofors |